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液相色譜儀的操作過(guò)程如下:
1. 翻開(kāi)HPLC工作站(包含計算機軟件和色譜儀),銜接好活動(dòng)相管道,銜接檢測體系。
2. 對抽濾后的活動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
3.過(guò)濾活動(dòng)相,根據需求挑選不一樣的濾膜。
4進(jìn)入HPLC操控界面主菜單,點(diǎn)擊manual,進(jìn)入手動(dòng)菜單。
5. 有一段時(shí)刻沒(méi)用,或許換了新的活動(dòng)相,需求先沖刷泵和進(jìn)樣閥。沖刷泵,直接在泵的出水 口,用針頭抽取。沖刷進(jìn)樣閥,需求在manual菜單下,先點(diǎn)擊purge,再點(diǎn)擊start,沖刷時(shí)速度不要超越10ml/min。
6. 調理流量,初度運用新的活動(dòng)相,能夠先試一下壓力,流速越大,壓力越大,通常不要超越2000。點(diǎn)擊injure,選用適宜的流速,點(diǎn)擊on,走基線(xiàn),調查基線(xiàn)的狀況。
7. 規劃走樣辦法。點(diǎn)擊file,選擇select?users?and?methods,能夠選擇現有的各種走樣辦法。若需樹(shù)立一個(gè)新的辦法,點(diǎn)擊new?method。選擇需求的配件,包含進(jìn)樣閥,泵,檢測器等,根據需求而不一樣。選完后,點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣辦法需求包含:a.進(jìn)樣前的穩流,通常2-5分鐘;b.基線(xiàn)歸零;c.進(jìn)樣閥的loading-inject變換;d.走樣時(shí)刻,隨不一樣的樣品而不一樣。
8. 進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣辦法,點(diǎn)擊start。進(jìn)樣,一切的樣品均需過(guò)濾。辦法走完后,點(diǎn)擊postrun,可記載數據和做符號等。悉數樣品走完后,再用上面的辦法走一段基線(xiàn),洗掉剩余物。
9 關(guān)機時(shí),先關(guān)計算機,再關(guān)液相色譜。